Analýza mozgovomiechového moku (CSF)

CSF (mozgovomiešnej alebo CSF ​​CSF) - biologická tekutina, ktoré sú nevyhnutné pre fungovanie centrálneho nervového systému. Jeho štúdia je jedným z najdôležitejších typov laboratórnych testov. Skladá sa z pre-analytickej fáze (príprava predmetu, zber materiálu a jeho dodanie do laboratória), analytická (vlastne robiť výskum) a postanalytickej (prepis výsledku). Jedine správne prevedenie všetkých manipuláciou na každom z týchto krokov určuje kvalitu analýzy.

Cerebrospinálny mok (CSF), je vytvorený v choroid plexus mozgových komôr. V dospelých ľudských subarhnoidalnyh medzery súčasne a pohybuje sa v komorách mozgu 110-160 ml CSF, v chrbticového kanála - 50-70 ml. Alkoholické nápoje je vytvorená kontinuálne v množstve 0,2-0,8 ml / min, v závislosti na intrakraniálneho tlaku. U zdravého človeka deň tvorená 350-1150 ml CSF.

Lúh získaný punkciou chrbticového kanála, častejšie - bedrovej - podľa metód dobre známych neurology a neurosurgeons. Jeho prvé kvapky sú odstránené ( "cestovná" krv). Potom sa kvapalina oddelí aspoň dvoch rúrok Tube v konvenčnom (chemické, odstredivky) pre bežné klinické a chemické analýzy, sterilný - pre bakteriologické vyšetrenie. Na formulári postúpenie na vyšetrenie CSF lekár by mal určiť nielen meno pacienta, ale aj klinické diagnózy a účel štúdie.

Treba mať na pamäti, že doručená vzoriek laboratórnych lúhu by mali byť chránené pred pergrevaniya alebo chladených a vzorky pre detekciu bakteriálne polysacharidy serogicheskih testy sa zahreje vo vodnom kúpeli po dobu 3 minút.

Aktuálne laboratórne testovanie mozgovomiechového moku (analytická fáza) sa vykonáva v súlade s pravidlami prijatými v klinickej laboratóriu v analýze všetkých biologických tekutín, a zahŕňa nasledujúce kroky:

- makroskopické analýza - posúdenie vlastností fyzikálno-chemických (veľkosť, farba, znak)
- počítaním počtu buniek,
- Mikroskopie natívneho príprava a cytológia farebné preparata-
- biochemický výskum,
- mikrobiologické vyšetrenie (ak je uvedená).

Považujeme za vhodné a informatívne v niektorých prípadoch doplniť štúdiu o imunologické SSR a prípadne - ďalších testov, ktorého význam je popísaná v literatúre.

Dekódovanie výkon CSF

Normálne bezfarebný CSF a porozrachna (ako destilovaná voda, v porovnaní s ich fyzikálne vlastnosti všeobecne popísať CSF).

Šedá alebo šedozelené likér je zvyčajne spôsobená prímesou baktérií a leukocytov. Červená CSF rôznou intenzitou (eritrohromiya) poháňané prímesou erytrocytov vyskytujúce sa, keď čerstvý krvácanie alebo poranenie mozgu. Vizuálne pristutstvuyut erytrocytov je zistená, keď obsah väčší ako 500-600 ul.

V patologických procesov môže byť kvapalný ksantohromnoy - farebné v žltej alebo žltohnedej produktov rozpadu hemoglobínu. Tiež zvážte xanthosis falošný - farebný likér spôsobené liekmi. Menej často sa stretávame s nazelenalý CSF (hnisavý zápal mozgových blán, mozgu absces). V literatúre sa opisuje farbu a korchnevy alkohol - útek kraniofaryngiom cysty v mozgovomiechovom dráhe tekutiny.

Zákal lúhu môže byť v dôsledku nečistôt krvných buniek alebo mikroorganizmov. V poslednom prípade sa zákal môže byť odstránená centrifugáciou. Keď je obsah v CSF zvyšuje množstvo hrubých bielkovín sa stáva opalizujúci.

Relatívna hustota mozgovomiechového moku získanej lumbálna punkcia, 1,006-1,007. Keď zápal mozgových blán, traumou mozgu relatívnej hustoty mozgovomiechového zvyšuje tekutiny do 1,015. To znižuje s nadprodukciou mozgovomiechového moku (hydrocefalus).

Pri zvýšenej hladiny fibrinogénu v CSF je vytvorený fibrínových film alebo zrazeninu, ktorá sa vyskytuje častejšie v tuberkulózne meningitídy. Niekedy je rúrka s kvapalinou sa nechá stáť pri izbovej teplote po dobu jedného dňa (ak je to potrebné k presnému nastavenia? - Ešte film vytvorený). V prítomnosti fibrinózní jeho filme dissezierující ihly sa prenesie na podložné sklíčko a zafarbené Ziehl-Neelsen alebo iného spôsobu identifikácie mykobaktérie. Normálny CSF 98-99% vody.

Avšak, štúdie o jeho chemické zloženie je dôležitou úlohou. To zahŕňa stanovenie hladiny proteínu, glukózy a chlorid, a je doplnený ďalšími ukazovateľmi v mnohých prípadoch.

Proteín v mozgovomiechovom moku

Viac ako 80% z bielkovín SSR z plazmy tečie ultrafiltráciou. Obsah proteínu normy v rôznych dávkach: ventrikulárna -, 05-, 15g / l, cisternal 0,15-0,25 g / l, bedrový 0,15-0,35g / l. Pre stanovenie koncentrácie proteínu v mozgovomiechovom moku môže byť použitý niektorý z normalizovaných metód (s kyselinou sulfosalicylovou a síran amónny, a ďalšie). Zvýšený obsah proteínov v mozgovomiechovom moku (giperproteinarhiya), môže byť v dôsledku rôznych patogénnych faktorov (tabuľka 1).

Štúdium CSF umožňuje nielen objasniť podstatu patologického procesu, ale tiež posúdiť stav hematoencefalickej bariéry. Indikátor pre tieto účely môže byť albumín, za predpokladu, že hladina v CSF je určená imunochemických metód. Stanovenie albumínu je vykonávaná v súvislosti s tým, že, ako sa krvný proteín nie je syntetizovaný lokálne, a preto môže byť len "marker" imunoglobulíny infiltrovaný z krvného toku v dôsledku poruchou bariéry permeability. Simultánne stanovenie albumínu v sére (plazma) krvi a CSF albumín nám umožňuje výpočet indexu:

Keď je intaktné hematoencefalickou bariérou, tento index je nižšia ako 9, s miernym poškodením - 9-14, s patrný - 14-30, s ťažkým poškodením - 30-100, a zvýšenie o viac ako 100 ukazuje na úplnú poruchu bariéry.

V posledných rokoch sa zvýšila záujem špecifický pre CNS proteíny lúhu - neurón enolázy, S-100 proteín, myelínové bázický proteín (MBP), a ďalšie. Jedným z najsľubnejších z nich na klinické účely Zdá sa, že MBP. V normálnom CSF je prakticky chýba (jeho koncentrácia nepresahuje 4 mg / l), a zobrazí sa len za patologických podmienok. Táto laboratórium funkcia nie je špecifická pre určité klinické jednotky, ale odráža veľkosť lézie (väčšinou spojené s likvidáciou biela pevná látka). Niektorí autori to sľubný definície MBP v mozgovomiechovom moku na sledovanie neuroAIDS zvážila. Bohužiaľ, dnes pretrvávajú problémy spojené s priamym stanovenie koncentrácie proteínu.

Glukózy v mozgovomiechovom moku

Glukóza sa nachádza v normálnom mozgovomiechovom moku v koncentrácii 2.00-4.18 mmol / l. Táto hodnota je spojená so značnými výkyvmi aj u zdravých ľudí, v závislosti na jedlo režimu, fyzickej aktivite a ďalších faktoroch. Presné vyhodnotenie hladiny glukózy v mozgovomiechovom moku súčasne určiť jeho hladiny v krvi, kde sa normálne je 2 krát vyššia. Zvýšené hladiny glukózy v krvi (giperglikoarhiya) sa vyskytuje u diabetes mellitus, akútna encefalitída, ischemickej poruchy prekrvenia a ďalších chorôb. Gipoglikoarhiya vidieť s meningitídou rôznych etiológiou, alebo aseptických zápalov, neoplastických lézií mozgu a membrány, najmenej - s herpes infekciou, subarachnoidálneho krvácania.

Niektoré výhoda oproti glukózy ako diagnostický marker je laktát (kyselina mliečna), ako je jeho koncentrácia v mozgovomiechovom moku (2 / 1-01 / 2 mmol / l), je nezávislý na ktoré v krvi. Jeho úroveň je významne zvýšená v rôznych stavov spojených s poruchou metabolizmu energie - meningitída, a to najmä - spôsobené gram-pozitívnymi flóry, mozgové hypoxia a niektoré ďalšie.

Chloridy v mozgovomiechovom moku

Chloridy - obsah v normálnom mozgovomiechovom moku - 118-132 mmol / l. Zvýšená koncentrácia v CSF je pozorovaná v rozpore s ich odstránenie z tela (obličky, srdce), degeneratívnych ochorení a nádorov CNS. Zníženie obsahu chloridov je označená s encefalitídou a meningitída.

Enzýmy v mozgovomiechovom moku

Alkoholické nápoje sa vyznačuje nízkou aktivitou enzýmov v ňom obsiahnuté. Zmena aktivity enzýmu v mozgovomiechovom moku v rôznych ochorení sú všeobecne nešpecifické a paralelné opísané posuny v krvi u týchto ochorení (tabuľka 2). Odlišný prístup si zaslúži interpretáciu zmeny v aktivite kreatínfosfokinázy (CPK). Tento enzým v tkanivách troch frakcií, ktoré sa vyznačujú nielen molekulárnymi rozdiely, ale aj povaha distribúcie v tkanivách: CK-MB (myokardu), CK-MM (sval), CK-BB (mozog). V prípade, že celková aktivita CK v CSF nemá základnú diagnostickú hodnotu (môže byť zvýšená, keď nádor, mozgový infarkt, epilepsia a ďalšie choroby), frakcia CK-BB je relatívne špecifický marker poškodené mozgového tkaniva a jeho činnosť v CSF je v korelácii s Glasgow meradle.

Počet buniek a mozgovomiechová tekutiny cytogramu

V štúdii biologických kvapalín a CSF, vrátane typicky spočítať počet buniek v cytogramu a šmuhy zafarbia azureozinom (Romanowského-Giemsa Nocht, Pappenheim). Počítanie buniek prvkov v mozgovomiechovom moku (stanovenie cytosis) vyrobené za použitia Fuchs-Rosenthal komoru, pre-chov to Samson činidla 10 krát. Používanie len vzhľadom k tomu, farbivo, skôr než akýkoľvek iný. To umožňuje bunkám, aby škvrny po dobu 15 minút a bunky zachovať nezmenené na 2 hodiny.

Počet buniek v celej bunky sa delia o 3 takto získaného cytosis v 1 ul. Pre väčšiu presnosť, za počtu buniek v troch komorách. Keď môže Fuchs-Rosenthal komora absencia Goryaeva použitie fotoaparátu, počítaním buniek naprieč mriežkou ako v troch komorách, výsledok sa násobí 0,4. Doteraz existujú rozdiely v jednotkách počtu buniek - počet buniek v komore, v 1 mm alebo 1 liter. Pravdepodobne je to účelné, však vyjadriť počet buniek v cytosis mikrolitrov. Na výpočet počtu bielych krviniek a červených krviniek v CSF môžu byť použité a automatizované systémy.

Zvýšený obsah buniek v mozgovomiechovom moku (pleocytózou) sa často objavuje u zápalových ochorení, v menšej miere - s meningeálnej podráždenie. Najprominentnejších pleocytóza videný s bakteriálnymi infekciami, plesňové poškodenie mozgu a tuberkulózne meningitídy. V epilepsia, arachnoiditídy, hydrocefalus, degeneratívne procesy, a niektorých iných chorôb počtu centrálneho nervového systému buniek zostáva normálne.

Farbenie buniek natívny preparát činidlo Samson umožňuje dostatočne spoľahlivo diferencovaných buniek. Ale presnejšie ich morfologické vlastnosti dosiahne po fixácii a farbenie cytologických prípravkov pripravených. Moderný prístup k príprave týchto produktov zahŕňa použitie cytospin. Avšak aj v Spojených štátoch, ktoré majú iba 55% laboratórií. Preto sa v praxi, je oveľa jednoduchší spôsob - ukladanie buniek na podložné sklíčko. Prípravky by mali byť dobre sušia na vzduchu a potom sa natierať.

Zafarbené vzorky sú počet buniek prvky. Tie sú reprezentované predovšetkým krvné bunky (obvykle - lymfocyty a neutrofily, pričom aspoň - monocytov, eozinofilov, bazofilov) môžu stretnúť v plazme a žírne bunky, makrofágy, zrnité guličky (degeneratívne tvorí špeciálny typ makrofágov - lipofagov schopný tukové degenerácie), bunky arahnoendoteliya, epindimy , Morfológia týchto bunkových elementov sú všeobecne dobre známe lekárom a laboratórna diagnostika je podrobne popísaný v mnohých učebniciach. Úroveň a povaha cytogramu pleocytózou CSF umožňuje určiť povahu patologického procesu (tabuľka 3).

Leukocytóza často sprevádzané akútne infekcie (lokálne a difúzna meningitída). CSF eozinofília je vzácny - ak je mozog echinokokóza, eozinofilná meningitída. CSF eozinofília nekoreluje spravidla s počtom eozinofilov v krvi. Lymfocytárnej pleocytóza CSF sa vyskytuje v vírusová meningitída, skleróza multiplex, chronickej fázy tuberkulózne meningitídy po operáciách na mozgových membránach. V patologických procesov CNS pozorovať polymorfizmus lymfocytov, medzi ktorými sú aktivované. Sú charakterizované prítomnosťou bohatú cytoplazmou s jednotlivými bledo azurofilních granulách, niektoré bunky otshnurovku alebo fragmentácie cytoplazme (clasmatosis). Plazmatické bunky sa objaví v cytogramu na vírusovú alebo bakteriálnu meningitídy, subakútna zápalových procesov, pri zotavenie z neurosyfilis. Monocyty prechádzajú degeneráciu v mozgovomiechovom moku rýchlejší lymfocytov pozorovaných u roztrúsenej sklerózy, progresívne panencefalitídy, chronický zápal tlejúcim. Makrofágy - "zriadenci" likér, objaví sa krvácanie, infekcie, traumatické a ischemickej nekrózy.

Niekedy CSF zistené abnormálne bunky - prvky, ktoré podľa ich morfologických charakteristík nemožno pripísať špecifických buniek foriem. Atypické bunky sa nachádzajú v chronických zápalových procesoch (tuberkulóznej meningitída, roztrúsená skleróza, atď.), A často sú nádorové bunky. Pravdepodobnosť nájde rakovinových buniek v mozgovomiechovom moku v mozgových nádorov je nízka (menej ako 1,5%). Detekcia blastových buniek v mozgovomiechovom moku u hematologických malignít naznačuje neuroleukemia.

Analýza zloženie lúhu je dôležité zhodnotiť pomer bielkovín a bunkových elementov (disociácia). Keď bunka-proteín disociácia poznamenať pleocytóza vyjadrené na normálny alebo mierne zvýšeným obsahom bielkovín. To je typické pre meningitídu. Belkovokletochnaya disociácia vyznačujúci giperproteinarhiey normálne cytosis. Táto podmienka je typické pre procesy stojatých v mozgovomiechovom dráh prúdenia (nádoru, arachnoiditídy et al.).

Klinických situáciách niekedy vyžadovať počítanie počtu erytrocytov v krvavej mozgovomiechovom moku (pre objem objectification krvácania). Počítanie červených krviniek, sú rovnako ako v krvi. Ako je uvedené vyššie, sa lúh farba zmení ak v 1 mm obsahuje viac ako 500 až 600 erytrocyty viditeľné farbenie vykonáva v prítomnosti asi 2000, a keď sa stane hemoragickej hladinu červených krviniek vyšší ako 4000 / L.

Mikrobiologické vyšetrenie mozgovomiechového moku

Jedným z najčastejších ochorení centrálneho nervového systému je hnisavý meningitídy. V takýchto prípadoch naliehavom mikorobiologicheskoe štúdie. To zahŕňa orientačný test - bacterioscopy drogy a kultúry techniky klasické. Bacterioscopy likér má obmedzenú diagnostickú hodnotu, a to najmä na prípravu transparentné CSF. Ster pripravená z kalové vody, získané odstredením okarshivayut metylénovej modrej alebo farbenie podľa Grama, aj keď niektorí autori sa domnievajú, že najnovšia verzia farby "trauma" vytvorené prvky a vytvára artefakty. Keď meningitída a abscesy nájdené rozmanité flóry zodpovedajúcu povahe ochorenia. Bez ohľadu na výsledky mikroskopia bakteriálnej meningitídy diagnózy musí byť potvrdená kultivačným testom, ktorý sa stáva rozhodujúcim faktorom v diagnostike tejto skupiny ochorení a výberu vhodného terapiu. To sa vykonáva v súlade s vyhláškou № 375 Ministerstva zdravotníctva Ruskej federácie 23.12.98 "On opatrenia na posilnenie dohľadu a prevenciu meningokokovej infekcie a hnisavú bakteriálnej meningitídy." Najčastejšou príčinou bakteriálnej meningitídy je gramnegatívne diplokokov Neisseria meningitidis, ktorý je možné detekovať 80% prípadov, aj keď mikroskopia.

CSF mikroskopie

Za normálnych okolností, v mozgovomiechovom moku sú prítomné iba lymfocyty a monocyty. V rôznych chorôb a patologických stavov v mozgovomiechovom moku sa môžu objaviť aj iné typy buniek.

Lymfocyty sú podobnej veľkosti na červené krvinky. Lymfocyty majú veľké jadro a úzky lem cytoplazmy bez náteru. Za normálnych okolností, v mozgovomiechovom moku obsahuje 8-10 lymfocyty. Ich počet je v nádory centrálneho nervového systému, zvyšuje. Lymfocyty sa vyskytujú u chronických zápalových procesov v plášťov (tuberkulóznej meningitídy, tsistitserkoznom arachnoiditídy).

Plazmatických buniek v mozgovomiechovom moku. Bunky väčšie ako lymfocyty, veľké jadro, umiestnený excentricky, veľké množstvo cytoplazmy s relatívne malým množstvom jadier (veľkosť buniek - 6,12 mm). Plazmatických buniek v mozgovomiechovom moku sa nachádzajú len v patologických prípadoch nie je trvanie súčasných zápalových procesov v mozgu, tak aj blany, s encefalitídou, tuberkulózne meningitídy, arachnoiditídy tsistitserkoznom a iných ochorení v pooperačnom období, keď pomalého hojenia rán.

Látkové monocyty v mozgovomiechovom moku. veľkosť pórov - od 7 do 10 um. V normálnom kvapaliny môže niekedy nastať ako jednotlivé kópie. Monocyty sa nachádzajú v mozgovomiechovom moku po operácii na centrálnu nervovú sústavu, s dlhým súčasným zápalovým procesom v škrupinách. Prítomnosť tkaniva monocytov hovorí o reakciu aktívneho tkanív a normálne hojenie rán.

Makrofágy v mozgovomiechovom moku. Môže mať jadra rôznych tvarov, zvyčajne sa nachádza na obvode jadra buniek cytoplazme obsahuje vakuoly a inklúzia. V normálnom makrofágov SSR nenastane. Prítomnosť makrofágov v normálny počet buniek v mozgovomiechovom moku sa pozoroval po krvácanie alebo zápalu. Zvyčajne sa vyskytujú v pooperačnom období, ktoré má prognostický význam a hovorí o aktivity čisteného roztoku.

Zrnité lopty do mozgovomiechového moku. Bunky s mastnou infiltrácie - s prítomnosťou makrofágov v cytoplazme tukových kvapôčok. V farbených prípravkov mozgovomiechového buniek tekutiny majú malé periférne umiestnený jadru a cytoplazme hrubý. Hodnota bunky sa líšia a závisia od pokrytých kvapôčok tukom. Granulované gule nájdené v patologickej tekutiny získané z mozgu cýst v ložiskách kolapsu mozgového tkaniva v nádoroch.

Neutrofily v mozgovomiechovom moku. Kamera je identický vo forme neutrofilov periférnej krvi. Prítomnosť neutrofilov v CSF aj v minimálnom množstve, alebo indikujú, k prvému, alebo ktoré majú zápalovú reakciu. Prítomnosť pozmenených neutrofilov označuje útlm zápalového procesu.

Eozinofily v mozgovomiechovom moku. Stanovená v mozgovomiechovom moku, ktoré majú jednotný, lesklé zrna. Eozinofily sa vyskytujú v subarachnoidálneho krvácania, meningitída, tuberkulóza a syfilis mozgových nádorov.

Epitelové bunky v mozgovomiechovom moku. Epitelové bunky, obmedzujú subarachnoidálne priestor, sa nachádzajú v mozgovomiechovom moku zriedka. Toto veľké guľaté bunky s malou kruhový alebo oválny jadrami. Sa nachádzajú v nádoroch, niekedy so zápalovými procesmi.

Nádorové bunky a komplexy v CSF. Tie sa nachádzajú v bunke a zafarbia prípravu roztoku. Malígny bunky môžu byť z týchto typov nádorov:

•  meduloblastóm;
•  spongioblastoma;
•  astrocytóm;
•  rakovinu.

Kryštály v lúhu. Nachádza sa v mozgovomiechovom moku zriedka, ak nádor dezintegrácie.

Prvky Echinococcus v likvore- háčiky scolexes, chitínový fragmenty shell - v mozgovomiechovom moku sú zriedkavé.

PCR diagnostika lúh

V posledných rokoch, niektoré prísľub etiologických diagnostických neuroinfekcií spojené s rozvojom molekulárne genetických techník pre detekciu nukleových kyselín z infekčných agens v mozgovomiechovom moku (PCR diagnostika).

To znamená, že kvapalina je stredne jasne reagujúca na patologických procesov v centrálnom nervovom systéme. Hĺbka a charakter jeho zmeny sú vzhľadom k hĺbke patofyziologických porúch. Správne laboratórne vyšetrenie liquorologic príznakov pomáha objasniť diagnózu a pre vyhodnotenie účinnosti liečby.